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测微尺在显微镜测量中的应用之直径测量

测微尺在显微镜测量中的应用之直径测量     在医学、生物学研究工作中,细胞小器官、细胞体、细菌体、组织、肿物、结晶等物体的多种几何参数可用显微镜进行测量。在本节中讲述利用奥林巴斯显微镜对物体的直径、面积、厚度、角度、数量.重量等几何参数的侧定。而熔点、粘度、酸碱度、温度、渗透压、等电点等等物理化学的侧量在本书中暂不介绍。关于荧光强度、光密度、光波、折射率、偏振光轴等光学参数将有专章介绍。     用于显微结构的直径或长度测定的主要用具称物镜测微尺和目镜测微尺。物镜测微尺是属于测量长度的标准量具.这是尼康显微镜蚀刻在玻片上的等距离0-100个格子组成的标尺。每1个小格的标准量度为10um即0.01 mm。在基层单位手头没有物镜侧徽尺时,可用血球计算盘的格子当作物镜测微尺也能达到测量长度的目的。临床化验室目前用的改良Neubauer25格型血球计算盘的中心格里的400个小方格的刻度距离为48.25m.     在医学、生物学研究工作中,细胞小器官、细胞体、细菌体、组织、肿物、结晶等物体的多种几何参数可用数码显微镜进行测量。在本节中讲述物体的直径、面积、厚度、角度、数量.重量等几何参数的侧定。而熔点、粘度、酸碱度、温度、渗透压、等电点等等物理化学的侧量在本书中暂不介绍。关于荧光强度、光密度、光波、折射率、偏振光轴等光学参数将有专章介绍。     物镜测微尺有明视野物镜测微尺和暗视野物镜测微尺两种。其标准量度完全相同。只 不过一种是在透明玻片上蚀刻有黑色标尺。这在明视野显微镜下容易观察。另一种是暗色背景下蚀刻出明亮的刻度,便于在较暗的视野下观察.     目镜测微尺有直线型、方格型或十字线型。不论哪一类型目镜测微尺的每个格子的间距都是等距离的。但目镜测微尺并不是任何长度的标准衡器。也就是说把目镜测徽尺装进目镜简中不可能测量长度。只有用}物镜测微尺的标准长度为目镜侧微尺的刻度间距标定长度,才能进行测量。这种程序首先从低倍物镜开始.将物镜测微尺安放在载物台上用低倍放大视野找到它的清楚刻度。再将目镜测微尺的刻度重叠在前者的刻度上。使两尺的零点对准后查找两测微尺的某处出现两尺完全重合的刻度,物镜测微尺的40格等于目镜测微尺的70格。这就是说目镜测微尺的70格的长度为400um。用下列式求得目镜测微尺的每个格距的长度.     每当转换物镜时,都要重新按照上述方法测定不同放大倍率下目镜测微尺的格距一般说来,一台生物显微镜的物镜和目镜固定下来的情况下,把每种放大倍率的目镜测微尺定标以后,物镜测微尺就不再使用了。只有改变镜筒长度或使用其他新购物镜、目镜时,才有必要重新定标,否则使用已定标准长度可以测量标本的尺寸大小。物体长度还可用光波的波长为标尺进行更加精确的测量。